荧光素酶检测试剂盒说明书(蛋白提取试剂盒说明书)

荧光素酶检测试剂盒说明书

荧光素酶检测试剂盒说明书本试剂仅供研究使用 标本:血清或血浆实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中荧光素酶。

用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入荧光素酶，再与HRP标记的抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。

颜色的深浅和样品中的荧光素酶呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样品中荧光素酶浓度。

试剂盒组成30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶6ml×1瓶8孔×8条6ml×1瓶6ml×1/瓶终止液6ml×1瓶0.5ml×1瓶1份2 酶标试剂标准品(64ng/L)0.5ml×1瓶30×1瓶3 酶标包被板4 样品稀释液5 显色剂A液6 显色剂B液10 说明书11 封板膜12 密封袋2张1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20°C保存，但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

检测原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中荧光素酶。

用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入荧光素酶，再与HRP标记的抗体结合，生成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成黄色，并在酸的作用下转化成终的黄色。

颜色的深浅和样品中的荧光素酶呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)。

标本要求1.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20°C保存，但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤1.标准品的稀释 本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

6.标准品的稀释

蛋白提取试剂盒说明书

蛋白提取试剂盒原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中动物成分(BSA)含量。

用纯化的蛋白质包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入动物成分(BSA)，再与HRP标记的&ssquo; Blue Green Marker ，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。

颜色的深浅和样品中的动物成分(BSA)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样品中动物成分(BSA)含量。

蛋白提取试剂盒操作步骤: 1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样 50l，待测样品孔中先加样品稀释液 40l，然后再加待测样品 10l(样品zui终稀释度为 5倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

稀释时先加入底物A50l，再加待测样品 10l(样品zui终稀释度为 5倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.加酶:各孔加入酶标试剂 50l，空白孔除外。

4.显色:每孔加入显色剂A50l，空白孔除外。

5.终止:每孔加终止液 50l，终止反应(此时蓝色立转黄色)。

6.测定:以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。

测定应在加终止液后15分钟以内进行。