il-1β检测试剂盒
il-1β检测试剂盒采用双抗体夹心夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被I型抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成黄色。
颜色的深浅和样品中的 IgM 呈正相关。
用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样本处理及要求1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4°C过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8°C1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。
将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。
推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。
为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。
后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心30分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
il-6 试剂盒
IL-6 试剂盒 主要用途:用于测定蛋白质,血清,血浆、细胞培养上清及相关液体样本中IgG的含量。
用纯化IgG来定量测定体液中IgM的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中IL-6。
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 HRP ,再与 HRP 标记的抗体 ,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物 TMB显色。
TMB在 HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。