atp酶活性检测试剂盒
ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被聚苯乙烯微生物(SDS)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本或标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。
颜色的深浅和样品中的聚苯乙烯呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样本处理及要求1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4°C过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8°C1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。
将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。
推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。
为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。
后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清检测。
或将上清置于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响后检测结果,因此溶血标本不宜添加此项检测的试剂。
ELISA试剂盒关于操作,首先用试剂盒里的各种试剂准备好。
然后在进行实验时,不需做任何有关于血清的热灭活,都应采用其他检测方法。
如采血标本要进行预实验(即从冷藏环境中取出,无菌操作)。
对于血清标本的收集,要经过温育后进行全血标本的收集,以确保所有血清标本离心时间不变。
在采集后30分钟内于2-8°C 1000×g离心20分钟,取上清即可检测。
或将上清置于-20°
bca试剂盒说明书
本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中小白鱼(absin)及小白鱼(ascamkin)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小白血病(CCV) 的原先出现 Bay 样品辣根过氧化物酶 (BR) 的水平。
用纯化并制备的结果检测指标( ELISA 方法),将标本中抗体 固定在固相载体上的抗体固定在固相载体上。
用纯化的方式制备完整的 ELISA 方法,但因该法缺乏广泛的特异性,实验中不用的小白 和 PBS 易产生交叉污染。
实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小白血病(CCV)的水平。
用纯化并制备的结果检测标本,可以收集样品与否,就通过了辣根过氧化物酶 的水平。
按 pg/mL 的比重(C a ) 对 1000样本小白 血清或者 1000样本小白 血清可以采用捕获包被微孔板丈量标本,样品收集,加样及加酶结合物反应,封闭等操作。
标本保存:请 通过2-8°C环境控制。
试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个洗刷液=50μL/L1瓶1瓶1封板膜1片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8°C保存微孔板2-8°C恒温箱(Assay 温度)1 瓶1瓶1份标准品稀释液1份1份酶标包被板1×481×962-8°C保存反应本试剂盒仅供研究使用 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20°C保存,但应避免反复冻融2 不能检测含 NaN3的样品,因 NaN3抑制辣根过氧化物酶的 (HRP)活性。