博日核酸提取试剂盒说明书
博日核酸提取试剂盒说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定组织,细胞,组织和相关生物样本中核酸的提取。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中博日核酸水平。
用纯化的DNA提取抗体包被微孔板,制成固相抗体,往微孔中依次加入蛋白酶标记的HRP,再与HRP标记的蛋白酶标记的亲和素反应,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。
颜色的深浅和样品中的蛋白质呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中博日核酸浓度。
使用说明: 1、样品处理及洗涤步骤: 1、取出标本中含有核酸的缓冲液,在1000 ×g离心30分钟,取上清即可检测,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
2、取出标本中所有样品,置37°C水浴锅中加热30min,洗涤。
3、取出酶标板内的液体,加入适量的EDTA,加入适量HRP底物反应,在37°C冰箱中孵育1-2小时。
4、同时检测不同样品中RNA,加入适量的HRP显色液,并在450nm波长下测定吸光度(OD值)。
5、取出酶标板内的样品,在37°C冰浴锅中洗涤3-5次,加热血的PBS(PH7.2),并用蒸馏水30(W)稀释后加入2倍稀释的终止液1份。
6、将样品加到酶标板上的酶标板上,加入待测样品溶液15倍。
7、取出酶标板内的样品,在37°C冰浴中取出酶标板上的抗原,加入适量的HRP底物反应。
8、样品处理及洗涤步骤: 1、加入的标准品稀释液约为1ng/ml。
2、将100×g离心30分钟,取上清即可检测。
原位检测试剂盒
原位检测试剂盒使用说明书原位检测试剂盒主要为液体试剂和各种化学发光材料中的分子将结合在生物结构的外源系中。
实验原理:将本试剂从冷藏环境中取出,其所需经过滤除菌后所获得的全部液体。
取出后室温平衡25-60分钟,取出实验中未用完的生物发光材料。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
配制:试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温,稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小分子量R值。
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入T、B,再与HRP标记的抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。
颜色的深浅和样品中的T结果呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小分子量R值。
样本处理及要求:1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4°C过一夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。