elisa试剂盒实验步骤
elisa试剂盒实验步骤: 本试剂盒用于测定血清,血浆及相关液体样本中人IgG的含量。
本试剂盒适用于体外定量检测血清或血浆中的种属。
有效期:6个月检测延长1个月产品用途:本试剂盒主要用于测定血清,血浆及相关液体样本中人IgG的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人IgG。
用纯化的人IgG抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人IgG,再与HRP标记的人IgG抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。
颜色的深浅和样品中的人IgG呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人IgG的含量。
样本处理及要求: 1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
elisa试剂盒能测什么
elisa试剂盒检测原理为用于体外定性检测人血清中抗凝剂或抗乳促感冒(RF)的含量。
操作中需注意防止氨基酸的交叉污染。
试剂盒中会有部分液体呈现结晶,这属于正常现象,需依据检测的具体条件,选择哪种结晶适合检测。
检测的样本要求为血清样本,采集后100×g离心10分钟去除颗粒。
按照试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
试剂盒标本须为血清,需要经121-37°C高压灭菌30min,超过60min蒸馏水即可用于检测。
在运用血清分离技术之前,应对微生物制备的试剂,避免菌体中可能含有内源性的HRP,若出现结晶,应将其分成小部分-70 °C保存,避免反复冷冻。
必须注意,不能使用过期的溶血培养箱。