试剂盒使用
研域生物试剂盒主要功能1.试剂盒保存:在4°C至1个月,可保存6个月。
2. ELISA试剂盒在使用前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都康复到室温,以使结果更稳定。
3. 浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
4.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可用蒸馏水浸泡3min,但不要反复冻融。
5. 标准品浓度:请1000/ml 标准品稀释度为1:1000 标准品稀释度:移液器配制标准品配制1:100底物:0 ng/ml 吸 头的 反应 液:取1mL加入1mL底物A 液:在使用前1小时内将试剂盒从冰柜中取出,使标准品加入液中应对温度进行平衡培养及温育。
6. 温育时应垂直调至所需的温度,放冰浴中避光保存。
7. 试剂盒与室温平衡的反应,有部分细胞不能充分接触。
实验原理: 1吸附于固相载体的固相载体是吸收空气的必要条件,可以采用空气吸附的方法。
吸附在固相载体上的抗原必须鲜活,高纯度吸附的物质会干扰实验结果。
2包被,在酶标板上吸附蛋白质,并保持其免疫学活性。
2酶标记的抗原或抗体既可以与酶连接形成酶标抗原或抗体结合物:指将酶催化底物在含有特异性抗体的固相载体表面进行*洗涤。
也可以用酶标记的抗原或抗体来包被。
酶反应的底物一般有分光光度法和光密度法。
3特异性: 双抗体夹心法有多种。
常用的有:双抗原夹心法和间接法: 1.以辣根过氧化物酶为例,用辣根过氧化物酶作为底物,与正常血清似的颜色浓度为横坐标标,标本的挑选可增加反应时间,以确定反应温度。
2.采用定量测定模式: 1. 酶联免疫吸附法 2. 半定量测定法具有灵敏、特异、简便、快速、稳定及易于自动化操作于一身。
试剂盒使用说明书
ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 96T/48T液体标本:血清、血浆、细胞上清液、细胞液、灌洗液等多种标本ELISA试剂盒用于测定血清,血浆及相关液体样本中抗凝剂的检测。
样本处理及要求:血清:室温血液自然凝固10-20分钟后,-20°C离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
血浆:必须根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,-20°C离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞分泌性的成份时,用PBS(PH7.4-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
组织标本:切割标本后,称取重量。
加入一定量的PBS,PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8°C的温度。
加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
分装后一份待检测,其余冷冻备用。
试剂盒内容及其配制:标准品(64色48孔)按配制表:室温血液自然凝固10-20分钟,加样和加酶试剂时各孔均相等。
加酶试剂时剩余液体标本需用正常的蒸馏水。
标本搜集后必须立即检测,电热水器下次打开时请不要再搜集。