孔雀石绿快检试剂盒
检测原理试剂盒采用双抗原夹心法酶联免疫吸附实验。
往预先包被孔雀素(sivalolium)捕获抗体的包被微孔板中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。
颜色的深浅和样品中的孔雀素(sivalolium)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
样本处理及要求1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4°C过一夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8°C1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。
将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。
推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。
为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。
后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清水检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000×g离心20分钟,取上清水检测。
5. 组织标本:移去孔雀素(sivalolium)的血液,将标本在吸水纸上拍干。
将标本放入座架后,剩余的样品或稀释液加入座架中,置37°C温育30~30分钟。
6. 血浆:取上清即可检测,或将上清置于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
孔雀石绿快速检测试剂盒
本试剂盒包含6种试剂:标准品、96孔雀斑、1条、96孔雀斑、1000个蓝斑斑、200个紫白色素B、40孔雀斑3种孔雀斑。
检测步骤:本试剂盒实验在有效期内通过一次检测获取的动物样品含量来进行快速检测。
注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免实验误差。
一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。
如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
11、部分试剂盒保存于2-8°C,部分仍需冰存。
11、本次实验不需用的部分应及时放回冰箱保存。
12、不同批号试剂不可混用。
13、底物请避光保存。
14、使用前恢复到室温。
15、实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保留,以免变质。
16、不用的其它试剂应包装好或盖好。
17、使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。