肌红蛋白试剂盒(肌酐试剂盒说明书)

  行业资讯     |      2023-03-20 14:11

肌红蛋白试剂盒

肌红蛋白试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中肌红蛋白水平。

用纯化的肌红蛋白抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肌红蛋白,再与HRP标记的肌红蛋白抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。

颜色的深浅和样品中的肌红蛋白呈正相关。

试剂盒内容及其配制1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

待测样品孔中每孔加样品100μl,待测样品孔中每孔加标准品稀释液100μl,待测样品孔中每孔加标准品稀释液100μl,每次加样后,微孔板上标准品准确加样5μl(样品zui终稀释度为5倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37°C温育30分钟。

4. 配制:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂100μl,空白孔除外。

7. 甩干:每孔加入酶标包被板50μl,空白孔除外。

8. 甩干:每孔先加入酶标试剂50μl,再加入显色液50μl,轻轻震荡混匀,37°C避光显色6分钟.10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。

测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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肌酐试剂盒说明书

肌酐试剂盒说明书 本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定血清,血浆及相关液体样本中肌酐的含量。

实验时将本试剂盒从冷藏环境中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。

解决方法: 1. 血清:操作过程中避免任何细胞刺激。

使用不含热原和内毒素的试管。

收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。

1000×g离心30分钟去除颗粒。

3. 细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。

1000×g离心10分钟,取上清液。

5. 保存:如果样本收集及保存不及时,应将其分成小部分-70 °C保存,避免反复冷冻。

尽可能的不要使用溶血或高血脂血。

如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。

不要在37°C或更高的温度加热解冻。

应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

肌酐试剂盒操作步骤: 标准品的纯度: 按说明书进行纯度调配试剂: 标准品纯度为100ng/ml 标准品配制: 1 预冷的PBS(预冷的PBS, 加入20倍浓度)PBS(加入20倍浓度)PBS(加入10倍浓度)PBS; 2 冷的PBS(加入15倍浓度)PBS(加入20倍浓度)容器内加样1. 标准品的稀释:计算1-5倍,按说明书的每份浓度稀释倍数进行稀释,计算时请*乘以总稀释倍数。

稀释倍数一般为:5倍标准品20倍标准品稀释倍数4. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样 50 µl,待测样品孔中先加样品稀释液40µl,然后再加待测样品 10 µl(样品zui终稀释度为 5倍)。

加完样之后,再加待测样品 10µl(样品zui终稀释度为 5倍)。

加完样后,分别加样和加待测样品 10µl(样品zui终稀释度为 5倍)。

加完样后,分别加样和加终止液10 ul 。

加完终止液后请立即分装和加酶结合物10 ul 后再加底物10 ul 停止反应。