人elisa试剂盒
人elisa试剂盒使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人抗体的含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胰岛素(INS)水平。
用纯化的人类胰岛素(INS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人抗体(INS),再与HRP标记的受体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。
颜色的深浅和样品中的人elisa试剂盒呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠胰岛素(INS)含量。
标本要1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20°C保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样 50µl,待测样品孔中先加样品稀释液 40µl,然后再加待测样品 10µl(样品zui终稀释度为 5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标, OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
操作程序总结:计算以标准物的浓度和 OD值为纵坐标,在坐标纸上,根据样品的 OD值由标准曲线查出相应的浓度;或将样品的 OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
人细胞因子elisa试剂盒
人细胞因子elisa试剂盒本试剂盒仅供研究使用。
检测范围: 96C/48T使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人细胞因子elisa试剂盒的含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人细胞因子elisa试剂盒。
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入细胞因子,再与HRP标记的抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。
颜色的深浅和样品中的细胞因子elisa试剂盒呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人细胞因子elisa试剂盒浓度。
标本要1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20°C保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样 50µl,待测样品孔中先加样品稀释液 40µl,然后再加待测样品 10µl(样品zui终稀释度为 5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
10.终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。
测定应在加终止液后 15分钟以内进行。
操作程序总:计算以标准物的浓度为横坐标, OD值为纵坐标,在坐标纸上,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD值代入方程式,小试管小试管小心地分离样品浓度,然后计算出样品浓度,再乘以稀释倍数(OD 值)为纵坐标,单独绘出样品的浓度。