非洲猪瘟检测试剂盒
试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T6ng/L -40 ng/L使用目的:本试剂盒用于测定非洲猪血清,血浆及相关液体样本中猪源性酶活性。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪源性酶活性。
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入猪源性酶标抗体,再与HRP标记的抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。
颜色的深浅和样品中的猪源性酶活性呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中猪源性酶活性的浓度。
试剂盒组成1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品(960ng/L) 0.5ml×1瓶2 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 10 说明书 1份5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20°C保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,然后在样品孔加上标准品稀释液 40μl 4°C 过夜,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl 12μl 12μl 13、加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置 37°C温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩
非洲猪瘟检测试剂盒厂家
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