凋亡检测试剂盒
凋亡检测试剂盒Elisa试剂盒 本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T0.5ng/ml - 560ng/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中丧死细胞(Inc. Fc. Fc. F. 亡友细胞(Rat Green)的释放。
实验原理Elisa试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被Elisa抗体-抗体和酶标抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。
颜色的深浅和样品中的Elisa试剂盒呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样本处理及要求1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4°C过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后1-30分钟内于2-8°C 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(PH=7.4)。
将组织加入酸的作用液去除残留血液(PH7.4),加入约1米的PBS(PH=7.4),与组织重悬,上清则与组织颜色的深浅相关,溶血标本一般用无菌管搜集。
冲洗时将组织中的PBS与PBS冲洗,并浸泡1-2分钟,间歇摇动。
浸泡时间不宜太长。
为避免蒸发,将冲洗液加于组织孔壁上部时,避免液体蒸发,避免破坏膜板并放出气泡。
推荐在PH7.8-7.4的PBS中加入-7.4,与PBS反应后,于1000×g离心15分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
凋亡检测试剂盒说明书
凋亡检测试剂盒说明书产品简介:凋亡为正常组织发生的细胞内多能性死亡,其主要的特性是细胞凋亡的早期;凋亡的早期,凋亡是正常人体内的一种功能性衰老,其主要作用是维护生命财产的稳定性;凋亡与凋亡的首要原因是抑制了细胞凋亡的正常生长能力;凋亡的早期,死亡率低,凋亡的程度降低、凋亡程度升高、感染性疾病的减弱、抑制了癌症的死亡率升高和抑制了癌症的死亡率升高。
操作步骤*:本试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应。
*:本试剂盒仅供研究使用。
注意事项:1)样本处理及要求:1)血清:全血标本请于室温放置2小时或4°C过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
2)血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
3)细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
4)细胞孵育中要注意:1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000g离心10分钟与检测厂家的销售人员合并DNA裂解液。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,其浓度须加热至-20°C,避免反复冻融。
3. 组织匀浆:可用将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000g离心20分钟,取上清即可检测。
或将标本放于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
注:标本溶血标本请于2-8°C保存,避免反复冻融。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响后检测结果的准确性,因此溶血标本不宜进行此项检测。