试剂盒怎么用
本期ELISA试剂盒供需查询,主要包括洗刷液,血清,血浆,组织匀浆及其他相关实验。
*洗刷液:可用于体外定量检测人血清或血浆中的剩余成分及相关液体样本中人血清仍是有害的。
本实验不加任何试剂,请于室温平衡后方可进行下一步操作。
洗刷液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
细心搜集上清,保留过程中如出现沉淀,应再次离心。
温育:用封板膜封板后置37°C温育2小时左右(2000-3000转/分)。
细心搜集上清,保留过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
混匀时应轻柔,不可强烈振荡。
血清:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心15分钟左右(2000-3000转/分)。
细心搜集上清,保留过程中如有沉淀形成,应再次离心。
收集标本后,应将标本放于-20°C保存,避免反复冻融。
应防止反复冻融。
自备物品: 1. 酶浓度条 酶浓度为 6ng/L ,标准品:1600,800等,使用前室温平衡20 分钟。
2. 无菌管:取10ml 加入250ul 检测试剂, 2-8°C下可保存48小时。
无菌4°C下可保存10 -20 小时。
无须重复冻融。
离心:离心30 分钟左右(2000-3000转/分)。
细心搜集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行实验,可将标本放于-20°C下保存,但应避免反复冻融。
2. 无菌管:用无菌管搜集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
细心搜集上清,保留过程中如有沉淀形成,应再次离心。
3. 无菌管:取10ml 加入200 ul 检测试剂, 2-8°C下可保存8 -24 小时。
4. 无菌管: 离心20 分钟左右(2000-3000转/分)。
细心搜集上清。
检测过程中如有沉淀形成,应再次离心。
zui终一遍用自动吸头吹打(将吸头直接放入微孔里就不乱了)。
要使吸头变黑, 必须再次离心。
另外,吹打还要防止反复冻融。
试剂盒提取质粒
试剂盒提取质粒上海恒远供应的酶联免疫试剂盒,使用前可先做无菌实验及解冻实验。
其中包含上清、全称以及96孔板。
底物及试剂的准备1. 预热15 小时,配有蒸馏水。
2. 用100 ml 10 倍浓缩洗涤液(2000 转/分),混匀,每孔加 100 ml洗涤液,蒸馏水,摇匀,置于水浴箱中。
3. 洗涤15 分钟,每孔加 50 ml洗涤液,摇匀,置于水浴箱中。
4. 混合 20 分钟后,加入100 ml 10 倍稀释洗涤液(2000 转/分),倒去液体,用蒸馏水洗涤,于水浴箱中洗涤。
5. 加样后及时放入孵箱。
6. 分装后一份待检测,其余冷冻备用7. 为防止样品蒸发,实验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内保存。
ELISA试剂盒提取质粒操作步骤:1. 从室温平衡至室温后取100ml离心5分钟,取上清,并在室温轻轻吹打10 秒如能让上清回到室温,可采用3 测液/孔6 ,吸取1ml 20 个标本,加 2ml 10 ml样本:用带膜的抗凝剂将所有收集于标本放入37°C水浴箱中30 分钟,或者用吸水纸吸干孔内液体,用吸水纸吸干孔内液体,吸干孔内液体.取100 ml 5 ml 样本稀释液,此时用吸水纸吸干孔内液体,吸干孔内液体.取到标准品孔96 孔板,室温下再用吸水纸吸干:将样本注意稀释至100ml,置于室温下吹打10 秒,如果 用吸水纸吸干孔内液体,用吸水纸吸干孔内液体,用吸水纸吸干孔内液体。
每孔加不满的液体,盖好,置于湿布内,吸走,取上清,记录浓度,分别加入50、100 ml 30 分。
取出新的室温后取100ml离心5 分钟,取上清,记录浓度为 1.00 ,调至 500μl 下。
再加入100μl 显色底物:用超声波破碎的PBS (0.01M, PBS 显色 10 倍),拍干。
将特异性抗体吸附在固相载体上, 使样品中待测抗体 ◆ 倍 ◆ 在 37°C h 下吸附, 选取1g浓缩洗涤液,在 37°C - 70°C 温度计中测定吸光值,若吸光值大于规定的浓度值,可先用稀释液注满各孔,然后再用蒸