抗体标记试剂盒
抗体标记试剂盒采用双抗体夹心夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被抗原或抗体分子的固相载体反响孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体、经过温育并*洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。
颜色的深浅和样品中的抗原或抗体呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
样本处理及要求1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4°C过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可,或将上清置于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000g离心15分钟,或将上清置于-20°C或-80°C保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:加入一定量的PBS,PH7.4,用蒸馏水或去离子水稀释后再使用。
注:标本溶血会影响后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
产品:血清或血浆:免费实验操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后,1000g离心20分钟将血红细胞迅速小心地分离。
操作注意事项1. 包被:所有抗原或抗体结合后,需在室温下平衡20min以上。
2. 包被液的选择,应合理。
所有试剂的选择,均应遵循包装密封、包装好、包装妥当、运输便当、实验服务保障等严密无菌。
3. 包被酶标板采用专业生产团队服务后,可为您分装、预包被,并在使用前3分钟将酶标板放在桌子上平行悄悄晃动30s,如果出现气泡,应及时的放回冰箱保存。
抗原试剂盒结果
抗原试剂盒操作步骤1.试剂应按标签说明书贮存,运用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前运用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光活络,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
避免溶血。
10.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
11、应注意的一点是,试剂盒保存在2-8°C,使用前室温平衡20 分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶*溶解必定融解。
加入底物时冲击力将与预先混合后,使结晶*溶解。
加入底物后请静置三十度,不要将未结合的化学成份洗净。
12.按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
13.临界值附近标本波动为正常现象,任何试剂均不可避免。
离子水或水溶液应按规定充分混合。
14.按说明书中标本的请求进行操作。
记录血清样本中的含量,根据实验所需要做的选择,可以自由选择。
离子水样本宜在新鲜时检测。
如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。
应留心的是,离子水或水溶液中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。
15.切记本底应静置三十度,避免持续时间颠倒切记不干预。