荧光素酶报告基因试剂盒(荧光素酶检测试剂盒说明书)

荧光素酶报告基因试剂盒

荧光素酶报告基因试剂盒名称:荧光素酶报告基因试剂盒品牌名称:科瑞捷检测限:0.5 ml / 细胞密度:450 kb/mL / 细胞指数:37.5 kMS / 细胞线性范围:0.1 mg/mL / 细胞浓度:0.2 mg/ml / 细胞培养标本:血清、血浆、组织匀浆、细胞培养液、细胞液、细胞裂解液、细胞沉淀等检测指标(P&D)。

试剂盒组成:总标准品20孔配置96孔配置保存条件:2-8°C冰箱1小时 2-8°C冰箱1个月 2-8°C冰箱4°C4°C离心20分钟，取上清液15分钟，取样品用蒸馏水或去离子水定量保存方式:2-8°C低温冰箱1天，-20°C冰箱2 小时。

试剂盒内容一:试剂盒的预包被操作1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样 50µl，待测样品孔中先加样品稀释液 40µl，然后再加待测样品 10µl(样品zui终稀释度为 5倍)。

加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置 37°C温育30分钟。

4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。

5. 温育:将100µl洗涤液用蒸馏水或去离子水定量保存，请10µµl后置37°C温育30分钟。

6. 终止:每孔加终止液 50µl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。

7. 测定:以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。

测定应在加终止液后15分钟以内进行。

8. 测定:以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。

测定应在加终止液后15分钟以内进行。

9. 温育:用封板膜封板后置37°C温育10分钟。

10. 测定:以空白空调零，450nm波长依序测量各孔吸光度(OD值)。

测定应在加终止液后5分钟以内进行。

12. 标准品稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图

荧光素酶检测试剂盒说明书

荧光素酶检测试剂盒说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定血清，血浆及相关液体样本中荧光素酶。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中荧光素酶。

用纯化的荧光素酶抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入荧光素酶，再与HRP标记的一抗抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。

颜色的深浅和样品中的荧光素酶呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样品中荧光素酶浓度。

试剂盒组成30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶6ml×1瓶12孔×8条6ml×1瓶6ml×1/瓶终止液6ml×1瓶0.5ml×1瓶1.5ml×1瓶1份2分钟后测定得的TMB含量。

洗涤缓冲液的配制:按标准曲线的线性范围的可通过标准计算出样品中荧光素酶的浓度。

标准品的含量主要是样品中荧光素酶的含量越多，就需要样品浓度。

产品内容标本:血清:全血标本请于室温放置2小时或4°C过一夜后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20°C或-80°C保存，但应避免反复冻融。

血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20°C或-80°C保存，但应避免反复冻融。

溶血标本:1000 x g离心20分钟，取上清即可检测。

洗涤缓冲液:1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20°C或-80°C保存，但应避免反复冻融。

细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20°C或-80°C保存，但应避免反复冻融。

细胞冻融物标本:1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20°C或-80°C保存，但应避免反复冻融。

注:标本溶血会影响zui后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

标本融化后仍然保持2-8°C的温度。