egfr试剂盒
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elisa试剂盒
B.ELISA试剂盒基本原理本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被B.S(免疫吸附剂)捕获的动物细胞中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的影响下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。
颜色的深浅和样品中的B.S(抗体)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。
样本处理及要求1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4°C过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20°C或-80°C保存，但应防止反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内完成反应，以开盖后，将标本在干燥剂自行配制PH7.4的磷酸缓冲液进行溶解，加入待测样本50μl，用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值)，计算出样本正确性和准确性。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M， pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果)，称重后将组织剪碎。
将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。
推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。
为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。
zui后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20°C或-80°C保存，但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响zui后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
注意事项.试剂盒保存在2-8°C，使用前室温平衡20分钟.稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存..不必。
. 只有吸取终止液和底物A、B液时才能使用.. 如果吸取量不足，应及时放回冰箱冻存。