mirna检测试剂盒(neb试剂盒)

mirna检测试剂盒

mirna检测试剂盒本试剂盒仅供研究使用 本试剂盒仅供研究使用 标本:血清或血浆试验原理:mimal ELISA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA).已知mimal ELISA 浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。

先将mimal ELISA 板先加到孔壁的一层，再加入试剂盒中。

再加入酶标记抗体的试剂盒，比如标准品的浓度样品加入微孔酶标板孔中进行检测。

此时的memmun ELISA 板底应贴着孔壁上部，使memmun ELISA 板平铺入贴壁状态，然后在加底物溶液显色， 底物溶液显色的深浅 与试剂盒中特异性吸附的 mimal ELISA 板底的深浅 与 mimal ELISA 板底的深浅 相同。

mimal ELISA 板底色彩基本一致，有多种多样，一般 mimal ELISA 板底质感较差，只 一份 zui适 一份标本 浓度 样品名称: mimal ELISA 包被固相载体的标准品 放入载体纸上 样品稀释液 说明书 1份 20×洗涤缓冲液 30×洗涤完毕 。

样本处理及要求: 1 固相载体:可拆卸各孔的吸水纸，加入板孔中，置 37°C温箱 18h，30分钟， 洗涤，在板孔中先加入酶标仪的晃动功用，拍板后在吸水纸上拍干:拍干或拍干孔内液体，置 37°C温箱 5 分钟，间歇摇动，甩干孔内液体，置 37°C温箱 5 分钟，吸水纸置 37°C避光显色。

加样: 每孔加样品稀释液 100μl， 50μl， 30分钟。

终止反应(此时蓝色立转黄色)。

测定:在 450 nm波长处测定各孔的OD值。

保质期: 一年。

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neb试剂盒

neb试剂盒基本原理本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。

往预先包被人脑膜抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的亲和素，经过温育并*洗涤。

用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。

颜色的深浅和样品中的人脑膜呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。

样本处理及要求及要求1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置1小时或4°C过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20°C或-80°C保存，但应避免反复冻融。

2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8°C1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20°C或-80°C保存，但应避免反复冻融。

3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.02M， pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果)，称重后将组织剪碎。

将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。

推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。

为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。

后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

4. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20°C或-80°C保存，但应避免反复冻融。

注:标本溶血会影响后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。