蛋白纯化试剂盒
蛋白纯化试剂盒简介蛋白质的纯化与纯化是蛋白质固相反应的一种反应,通过各种酶活性的反响与测定来确定蛋白质在一定条件下所形成的水平。
一般情况下,纯化的蛋白质zui适浓度为1~10。
蛋白质纯化试剂盒的原理: 蛋白质的基本来源主要有3点要点:1 纯化需要经过滤除杂和纯化,可分为酸碱、碱度水解纯化和酸度水解; 2 纯化主要由氨基化、酚化、氨基化和酵母三个阶段合成而成,一般在春秋时期才会出现。
本产品通常为去壳,直接用PBS直接提取其分成磷酸缓冲液,以提取缓冲液当作缓冲液提取,缓冲液为加样缓冲液,但由于样品中待测物质的种类较多,故而要适时地去掉未用的物质。
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血清蛋白试剂盒
本试剂盒用于体外定量测定血清,血浆,组织及相关液体样本中血清蛋白(AFP-A)、血C(AFP-A)、血小板、管内脂质样本以及相关液体样本(血清样品中蛋白复合物),并与其它成份交叉反应。
使用前仔细阅读说明书,全面了解试剂盒的实用性。
检测原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中血清蛋白。
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入血清蛋白,再与 HRP 标记的抗体结合,形成抗体 -抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物 TMB 显色。
TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。
颜色的深浅和样品中的血清蛋白呈正相关。
用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中血清蛋白含量。
血清蛋白试剂盒组成:实验组(配制)1- 标准品;- 标准品:(1) 标准品浓度依次为:20、20、10、5、2.5 pg/mL,样本浓度分别按 g/ml 和10pg/mL洗涤;-20°C,避光保存;-100°C,避光保存;-70°C(约 20 min),标准品浓度依次为: 100、200、200、400 pg/mL , 样本浓度分别按 pg/mL 和 10pg/mL 计算;-20°C,避光保存;-80°C,避光保存。
操作步骤:1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样 50µl,待测样品孔中先加样品稀释液 40µl,然后再加待测样品 10µl(样品zui终稀释度为 5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置 37°C温育 50 分钟。
4. 配液:将 30倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30s后将洗涤液用蒸馏水 30倍稀释后备用。
6. 加酶: 空白孔除外。
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