elisa试剂盒使用说明书(elisa试剂盒免费代测)

  行业资讯     |      2023-04-21 18:14

elisa试剂盒使用说明书

elisa试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人血清水平。

用纯化的人血清(抗体)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入血清或血浆,再与 HRP 标记的血清(抗体)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物 TMB显色。

TMB在 HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。

颜色的深浅和样品中的血清呈正相关。

检测标本必须为液体,不含沉淀,应经121°C高压蒸汽灭菌30分钟,并经常校对其准确性,以避免溶血,标本用离心管收集,收集血液时需要提前一小时将血清和管盖紧盖好。

血清标本宜在新鲜时检测。

如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。

如在冰箱中保留过久,其中的可发生聚合,在相同温度下可使反响过夜。

血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP 为标记的ELISA 测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。

血清标本可按常规方法采集,应注意防止溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP 为标记的ELISA 测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。

标本在使用前仍然保持2-8°C的温度,辣根过氧化物酶(HRP)活性。

ELISA 测定中,在 HRP 酶的催化下,结果变色如图所示,使本底加深。

若出现这种情况,应在室温下解冻并尽早分装解冻。

如果结合部位有絮状物,并且颜色比较深时,可根据颜色反应的具体时间选择适合的稀释倍数。

稀释后可在后面的温育期中有效一些。

通常说来,在 5 个工作日内使用 1 对 2 2 4 次 2 瓶 3 瓶 4 瓶 终止液 应尽量在室温下解冻。

2 标本在使用前也须进行 10 分装解冻后,样品如不及时使用,请按一次使用量分装后放在-20 °C或-80 °C条件下解冻。

3 使用 蒸馏水 冲洗 后,按 HRP 重新使用时会受到 的影响,洗涤和加样时间 须慎重。

4 试剂盒保存: 在 2-8 °C 下,使用 蒸馏水冲洗 , 若 样品不立即使用,应将其分成小部分-70 °C保存,避免反复

elisa试剂盒免费代测

elisa试剂盒免费代测一、代测过程elisa试剂盒采用双波长夹心法酶联免疫吸附试验。

往预先包被抗人IgG(或抗鼠IgM)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。

用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。

颜色的深浅和样品中的人IgG(或抗鼠IgM)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

二、样本处理洗涤*在运用微孔板板孔接种酶标板后,在吸水纸上拍干微孔板中每孔均需加满酶标板,使标本充分分散。

再加入底物TMB显色,并在波长:参考标准品450nm处测量O.D.值。

三、包被抗人IgG(或抗鼠IgM)抗体包被微孔板(此时蓝色立转黄色)。

四、测定抗人IgG(或抗猴抗体)的水平。

试剂盒中本次试验不需加的样本将视为加样将样品加在酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

包被抗人IgG(或抗猪IgM)抗体应用袋操作时,溅起液体后,可将液体溅出吸水纸在吸水纸上拍干。

加样后,可通过吸水纸在酶标板上拍干。

加酶反响底物用洗涤液后,底物被洗涤物的稀释到相应的浓度后,可进行稀释,洗涤时每次洗涤都应看清光量与样品浓度之间的差别。

此外,在去除洗涤过程中的一些非特异性吸附3D底物后。

封闭液的稀释:该封闭液不含带金属部分的可溶性物质如金属部分,请避光保存。

请勿使用含金属部分的可溶性物质如内源性HRP,塑料部分则可能会对抗人IgG(或抗鼠IgM)抗体进行充沛洗涤。