磁珠法试剂盒(磷脂试剂盒)

磁珠法试剂盒

磁珠法试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用 标本:血清或血浆试验原理:磁珠是一种分子量越多，吸附于固相载体的表面，其成分就越少，可以被蛋白质和聚苯乙烯固相载体吸附到固相载体表面，从而减小实验特异性反响。

用纯化的磁珠，即可辨识是否受污染的物质，也可用酶标仪进行测定。

在这种测定方法中有3种必要的试剂:(1)固相的抗菌素原或其他试剂:硅胶或硫酸胶提取试剂:二硫酸胶(碳水化合物中含有糖苷酶)和磷酸胶提取试剂:乙醇和氨基类试剂:乙烯和氨酸类试剂:甲醛、肝素、醋酸类试剂:乙酸、氯化钠、葡萄糖、乙油脂、醋酸糖类。

检测原理:采用双抗原夹心一步法酶联免疫吸附试验(ELISA)。

往预先包被抗原的固相载体上依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。

用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。

颜色的深浅和样品中的抗原或抗体呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。

方法:将标本在标准液标准液中加0.1ml，4°C过夜，然后稀释(如果样品不加，应再加相应试剂)样品及残留在孔内的液体后，进行稀释，稀释后样品加样均应在酶标板上取得。

试剂盒组成及要求:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8°C保存双抗原夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA):1、用包被缓冲液将抗原稀释至所需浓度;2、将抗原稀释至所需浓度;3、加样将样品加在酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀使之凝聚起来。

使用加样器加样器应尽量轻缓，同时应避免起泡。

加样过程中避免液体外溅，血清残留在反应孔壁上，加样器吸头不对或阻塞孔壁。

加样过程中避免液体外溅，血清残留在反应孔壁上，加样器吸头与孔壁贴壁需避免产生气泡。

温育时间:接种标本需避免时间误差。

试剂盒组成:标准品、样本稀释液:2-8°C(较长时间不用时)，-20°C(频繁使用时)。

20×洗涤缓冲液:0.1

磷脂试剂盒

磷脂试剂盒应用双抗体一步夹心夹心法测定标本中人磷脂。

用纯化的磷脂酶标记人磷脂，抗体包被微孔板，往包被单抗的微孔中依次加入磷脂酶标记人磷脂，再与HRP标记的磷脂，形成标准的磷脂复合物。

根据标本的要求，通过选择合适的包被缓冲液，在相同的温育条件下，用洗涤法zui后将包被的磷脂洗涤液稀释至zui适浓度，然后再加到酶标板孔的底部，将样品稀释液添加至相应的稀释液中，溶解样品中的其他成分，然后在洗涤缓冲液中加样后放入孵箱中温育1小时。

磷脂试剂盒操作步骤:1，用无菌管将包被液体注入孔中，使其充分溶解，使包被上的抗体与酶标抗体反应3分钟到一起，再加入酶标记物1并催化底物3分钟后含受检物3分钟至所包被的微孔中。

甩去孔中液体后在吸水纸上拍干。

每次加入标本都必须再次拍干。

2，甩干包被液后，底物A、B液有必要稀释后立即加入，温育过程中，包被上清液将样品洗净。

离心 50 分钟左右( 2000 转/分)。

3，甩去洗涤液后将HRP标记的磷脂洗净。

甩干洗涤液，在吸水纸上拍干或甩干。

甩干后再将TMB显色。

4，孵育30分钟或甩干，拍干应在 30 分钟内加入，加入终止液终止反应。

样品浓度下步， 分别用于检测吸光度值、浓度和样品中样品的浓度，如标本中待测物质浓度很高，则应进行稀释即为样品中待测物质的浓度。

样品中的其他物质1 浓度须遵循滴定值，滴定量测定(见酶标仪)。

3，要先分装取含量适中的酶标记物，室温放置 2 小时后，再通过洗涤以清除。

4，洗涤需要，洗板不充分将影响洗涤成果的高纯度洗涤液需要稀释到对应的浓度。

5，浓洗涤液稀释后应当分批使用，取出要储存，标准品浓度是空白对照孔和标准洗板孔中标准溶液孔中标准溶液的浓度。

6，浓洗涤液稀释后要分装，以免不同浓度的样品体积过大导致洗板等待时间长。

7，标准洗涤液中先加入底物A、B液，然后再加入终止液终止反应。

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